Обработка и окрашивание костной ткани

Особенности методики приготовления постоянных гистологических препаратов некоторых органов и тканей

Обработка и окрашивание костной ткани

I. Обработка и окрашивание костной ткани. Наличие в межклеточном веществе костной ткани солей кальция придает ей твердость, затрудняющую приготовление препаратов.

Поэтому обработка костной ткани включает приготовление срезов после специальной предварительной подготовки объекта – декальцинацией в водном растворе азотной кислоты 5-7% концентрации, кроме того, одним из способов получения препаратов из костной ткани является приготовление тонких костных пластинок (шлифов) из клубочков нефиксированной костной ткани путем стачивания последних. Наиболее распространенным методом окраски срезов декаль-цинированой кости является окраска по Шморлю (тионином с пикриновой кислотой), после чего общий фон срезов приобретает коричневый или болотный цвет, а костные клетки и их отростки окрашиваются в красный.

II. Приготовление тотальных препаратов. В тех случаях, когда необходимо изучить микроскопическую структуру объекта, имеющего пленочное строение (серозные, мозговые оболочки), готовят целостные тотальные препараты. Для этого участок пленки во избежание складок расправляют и фиксируют на ровной поверхности.

По окончании фиксации материал обрабатывают обычным способом или, если объект сам по себе достаточно тонок и имеет естественную окраску, можно ограничиться лишь фиксацией, просветлением и заключением его (например, при выявлении пигментных клеток твердой и мягкой мозговых оболочек) или фиксацией, окрашиванием (препарат мелких сосудов мягкой мозговой оболочки).

III. Приготовление и окраска мазков крови. Для морфологического исследования клеток крови и подсчета лейкоцитарной формулы готовят мазок крови.

Он должен отвечать следующим условиям: 1) начинаться на расстоянии 1 см от края предметного стекла и заканчиваться не доходя до края противоположной стороны на 2-3 см; 2) препарат должен быть равномерной толщины, а не волнообразным; 3) слой крови не должен достигать краев стекла. В противном случае в мазке эритроциты будут лежать густым слоем, и образовывать монетные столбики.

Фиксируют метиловым (этиловым) 100° спиртом и окрашивают по методу Романовского – Гимза (азур-2 с эозином). Первый окрашивает базофильные структуры клеток в ярко-синий цвет, а эозин-оксифильные части в розово-красный.

IV. Гистологические препараты для пунктатов органов. Диагностическая пункция (взятия материала с помощью специальных игл) все больше входит в гистологическую практику.

Гистологические препараты из пунктата обладают преимуществом перед мазками, поскольку они позволяют изучить структуру нормальной и патологически измененной ткани. Пунктат смешивают в чашке Петри с раствором лимоннокислого натрия для предупреждения свертывания крови.

После кратковременного стояния жидкое содержимое сливают, а осевшие плавающие частички собирают на полоску фильтровальной бумаги. Эту процедуру проводят несколько раз.

Собранный материал вместе с фильтровальной бумагой фиксируют в зависимости от взятого органа (например, печень в 10% формалине, костный мозг в жидкости Ценкера) и по окончании фиксации промывают в проточной воде, проводят через спирты и заключают в парафин, предварительно отделив фильтровальную бумагу. Окраска производится в зависимости от цели исследования.

Хронокарта

1. Организационная часть с мотивацией темы – 5 мин.

2. Программированный контроль – 10 мин.

3. Опрос-беседа – 35 мин.

4. Объяснение препаратов – 10 мин.

5. Перерыв-15мин.

6. Контроль за самостоятельной работой студентов. Помощь в работе с препаратами – 65 мин.

7. Подведение итогов. Проверка альбомов – 10 мин. Время лабораторного занятия: 3 часа.

Мотивационная характеристика темы

Развитие гистологии как науки и ее дальнейший прогресс тесно связаны с совершенствованием методов исследования. Гистология располагает большим арсеналом средств для изучения биологических структур на всех уровнях их организации: клеточном, тканевом, органном.

Методы исследования, применяемые гистологией, необходимы врачу любого профиля для диагностики, лечения и профилактики заболеваний, познания причин, вызывающих болезни и осложнения их течения. Материалы темы «Гистологическая техника» способствуют активному формированию мировоззрения будущего врача.

Взаимоотношения между структурой и функцией рассматриваются с позиции диалектического представления о единстве материи и ее движения; нет структуры без функции и нет функции без структуры. Структура является материальным субстратом любой функции организма.

Необходимо отметить, что прогресс современной гистологии в большей степени определяется тем, что она основывается на достижениях физики, химии, математики и информационных технологий. Внедрение новейших методов исследования обусловило бурное развитие биологических наук, в том числе гистологии, обеспечивает широкое внедрение гистологии в клинические дисциплины.

Учебная цель

Общая цель. Знать содержание предмета и общебиологические основы гистологии. Уметь приготовить постоянный гистологический препарат.

Конкретная цель. Знать цели и задачи гистологии, цитологии и эмбриологии. Иметь представление о вкладе отечественных ученых в развитие гистологии. Знать современное представление о клеточной теории. Знать основные этапы приготовления постоянного гистологического препарата.

Необходимый исходный уровень знаний

Из других предметов и предшествующих тем. 1. Свойства химических веществ. 2. Правила работы со световым микроскопом. 3. Правила работы с кислотами и щелочами.

Из темы текущего занятия.

1. Предмет и задачи гистологии.

2. Клеточная теория.

3. Методика окраски гематоксилин-эозином и по Ван-Гизону.

Вопросы для самоподготовки

1. Гистология как наука, ее признаки.

2. Гистология как учебная дисциплина, ее основные разделы.

3. Исторические этапы развития гистологии.

4. Клеточная теория и ее современная трактовка.

5. Основные этапы приготовления постоянного гистологического препарата.

Рекомендации для работы на занятии

Задание 1. Окрасить целлоидиновые срезы гематоксилин-эозином. Объект изучения: целлоидиновые срезы органов. Ориентировочные основы действий: срезы из дестиллированной воды переносят в раствор гематоксилина на 2-5 мин.

Окрашенные срезы дифференцируют в проточной воде 10-15 мин. Затем их переносят в дистиллированную воду, после чего окрашивают эозином 3-5 мин. и быстро споласкивают дистиллированной водой. Обезвоживают 96° спиртом (быстро). Просветляют в карбол-ксилоле в течение 2-3 мин.

и заключают в бальзам.

Задание 2. Окрасить целлоидиновые срезы по Ван-Гизону. Объект изучения: целлоидиновые срезы органов. Ориентировочные основы действий: срезы из дестиллированной воды переносят в раствор гематоксилина на 2-5 мин.

Затем срезы помещают в проточную воду на 10 мин. После срезы переносят из проточной воды в дистиллированную воду, а затем – в раствор пикрофуксина на 3-5 мин. Быстро споласкивают дистиллированной водой. Проводят через 96° спирт (быстро). Просветляют в скипидаре, карбол-ксилоле в течение 2-3 мин.

Заключают в бальзам, затем покрывают стеклом.

Ситуационные задачи

1. Исследователю необходимо выявить жировые включения в клетке. Какими методами окраски можно воспользоваться для достижения поставленной цели?

2.Какими методами окраски можно пользоваться для выявления эластических структур?

3. Какими методами окраски можно пользоваться для выявления гликогена?

4. Какой метод исследования можно применять для выяснения источников и путей иннервации органов?

5.Каким методом микроскопирования необходимо воспользоваться для определения сухого веса клетки?

Основная и дополнительная литература

Основная литература: 1) П. А. Мотавкин. Курс лекций по гистологии. – Владивосток: «Медицина ДВ», 2007; 2) Гистология человека в ответах на вопросы / под ред. П. А. Мотавкина, Н. Ю. Матвеевой); 3) Учебник гистологии / под ред. Ю. И. Афанасьева, Н. А. Юриной. – М.: «Медицина», 1999, 2001.

Дополнительная литература: 1) М. Уикли. Электронная микроскопия для начинающих. – М.: «Мир», 1978; 2) Н. Луппа. Гистохимия. – М.: «Мир», 1979; 3) Ю. С. Ченцов. Общая цитология, 1978; 4) Г. А. Меркулов. Курс патогистологической техники, 1969.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском гугл на сайте:

Источник: https://zdamsam.ru/b66699.html

Основы гистологии – Обработка и окрашивание костной ткани, декальцинация, окрашивание

Обработка и окрашивание костной ткани

Подробности Категория: Архивы

Костная ткань по физическим свойствам занимает особое место среди тканей организма. Наличие в ее межклеточном веществе солей кальция придает ткани твердость, значительно затрудняющую приготовление гистологических препаратов, поэтому обработка костной ткани имеет свои особенности.

Существуют два основных способа получения гистологических препаратов: 1) приготовление срезов после специальной предварительной подготовки объекта, суть которой сводится к растворению и удалению из костной ткани неорганических солей (декальцинация); 2) приготовление тонких костных пластинок (шлифов) из кусочков нефиксированной компактной кости путем стачивания последних.

Декальцинация

Прежде чем приступить к декальцинации, кость, как и любую ткань, необходимо подвергнуть фиксации. Выбор фиксатора зависит от целей и характера исследования.

Так, для обзорных препаратов и выявления фибриллярных компонентов костной ткани применяют чистый формалин (15—20% раствор), в то время как для цитологических исследований предпочтительней сложные фиксаторы, также содержащие формалин, ибо он уменьшает степень набухания волокнистых структур при последующей обработке ткани (например, фиксатор Штиве: насыщенный водный раствор дихлорида ртути — 76 мл, формалин — 20 мл, ледяная уксусная кислота — 4 мл). Для фиксации следует выпиливать лобзиком небольшие кусочки кости (толщиной 0,5—1 см), так как из-за высокой плотности ткани фиксатор проникает медленно. Срок фиксации зависит от толщины кусочка (не менее 48 ч). По окончании фиксации объект тщательно промывают в проточной водопроводной воде или спирте (например, после сложных фиксаторов, содержащих дихлорид ртути), так как при последующей обработке кислотами могут образоваться труднорастворимые осадки. После этого в целях обезжиривания препарат проводят через ряд спиртов повышающейся концентрации (50, 70 и 96%), а затем доводят до воды через спирты нисходящей концентрации. Декальцинация достигается обработкой костной ткани с помощью декальцинирующих жидкостей, обладающих свойствами растворять неорганические соли, не повреждая структурные элементы кости.

При декальцинации следует придерживаться следующих основных правил:

  1. применять большое количество декальцинирующей жидкости и сменять ее ежедневно (объем жидкости должен превышать объем объекта не менее чем в 50—70 раз);
  2. декальцинируемый объект помещать в верхнем слое жидкости, чтобы обеспечить опускание на дно растворяющихся солей (подвешивание кусочков на нитке или в стеклянном сите);
  3. проводить декальцинацию до полного удаления минеральных солей (но не передерживать материал в жидкостях, так как это приводит к набуханию фибрилл и ухудшению окрашиваемости структур).

Декальцинация считается полной тогда, когда объект становится мягким и режется ножом легко и без хруста. Ход процесса можно проверять по степени погружения в объект препаровальной иглы. Сгибать препарат и надавливать на него не рекомендуется, так как это приводит к повреждению тонких структур кости.

Декальцинация в водном растворе азотной кислоты (5—7,5%) является наиболее распространенным способом. Для приготовления рабочего раствора в мерную посуду наливают 5—7,5 мл химически чистой концентрированной азотной кислоты (плотность 1,40) и доливают до 100 мл дистиллированной водой (раствор можно готовить впрок в больших количествах, рассчитав общую потребность).

Применять более низкие и более высокие концентрации раствора для декальцинации кости не рекомендуется, так как первые вызывают набухание, а вторые — повреждение клеточных структур. Более высокие концентрации (до 10%) используют лишь для декальцинации зубов. Налив нужное количество жидкости в подходящий стеклянный сосуд, в нее подвешивают подготовленный к декальцинации кусочек кости.

Раствор сменяют ежедневно до наступления полной декальцинации. Срок декальцинации зависит от свойств объекта (плотность, величина) и концентрации азотной кислоты. Средняя продолжительность декальцинации небольших кусочков компактной костной ткани 10—12 сут.

По окончании декальцинации для устранения набухания волокнистых структур препарат подвешивают на 24 ч в 5% раствор сульфата натрия или лития (в случае отсутствия таких солей кость следует поместить в 96% спирт) и лишь после этого тщательно промывают в течение 1—2сут в проточной водопроводной воде.

Можно сократить срок получения декальцинированной кости, поместив выпиленный кусочек непосредственно в 5% раствор трихлоруксусной кислоты, содержащий 10—20% формалина. Эта смесь одновременно фиксирует и декальцинирует. Маленький кусочек средней плотности можно декальцинировать за 3—5 дней. После декальцинации промывают в спирте (ни в коем случае не в воде!).

Существует ряд других способов декальцинации, но все они основаны на одном и том же принципе и требуют соблюдения изложенных выше общих правил. После декальцинации костную ткань можно резать на замораживающем микротоме, а также заливать в целлоидин или целлоидин-парафин обычным путем. Заливка в парафин не рекомендуется, так как он плохо пропитывает декальцинированную кость.

В настоящее время отечественная промышленность начала выпускать специальный микротом санного типа, позволяющий резать кость без предварительной декальцинации, получая срезы толщиной 20—50 мкм.

Окрашивание

Наиболее распространенный метод окрашивания срезов декальцинированной костной ткани — по Шморлю (тионинпикриновая кислота). Рабочие растворы: А — насыщенный раствор тионина в 50%спирте, Б— 1% водный раствор фенола, В — насыщенный раствор пикриновой кислоты.

Перед употреблением сливают 1 часть раствора А с 10 частями раствора Б. Находящиеся в воде срезы переносят на 10 мин в полученную смесь, после чего споласкивают в дистиллированной воде и помещают на 30—60 с в насыщенный раствор пикриновой кислоты.

Затем срезы вновь споласкивают в дистиллированной воде и дифференцируют в 70° спирте до получения темно-красной окраски.

После этого их переносят в 96° спирт, в котором продолжают дифференцировку (под контролем в микроскоп) до тех пор, пока общий фон среза не приобретет коричневый4 (или болотный) цвет, а костные клетки и их отростки — красный. Окрашенные срезы затем проводят через 96% и абсолютный спирт, карбол-толуол, толуол и заключают в бальзам.

Если срез плохо окрашивается из-за длительной декальцинации в азотной кислоте, его нужно предварительно поместить на 2—3 ч в 0,5% аммиачную воду, после чего хорошо промыть в дистиллированной воде и затем окрасить.

Источник: https://lmed.in/info/arhivy/osnovy-gistologii-57.html

Гистологические окраски 2

Обработка и окрашивание костной ткани
andreas_zarusОрсеин   Эта гистологическая окраска используется для выявления эластиновых волокон, особенно это актуально в патологической анатомии кровеносных сосудов. Этот краситель добывается из нескольких видов лишайников.

На снимке ниже представлены эластиновые мембраны аорты – самого крупного сосуда тела человека, функция которого заключается смягчить, мощную «ударную волну» сердечного сокращения и провести поток крови к более мелким ветвям.

Аорта относится к сосудам эластического типа, так как в ее стенке содержится множество таких эластиновых мембран, куда больше чем в артериях других типов.Автор фотографии:  уточняется

Источник: University of Tasmania. School of Medicine secure.health.utas.edu.au

Осмия тетрооксид (Оксид осмия(VIII))

   Другая окраска на жироподобные вещества, хотя сейчас, чаще используется как фиксатор для приготовления препаратов для электронной микроскопии. Он связывает ненасыщенные липиды (в области двойных связей) и, таким образом ткани с большим количеством полиненасыщенных жиров окрасятся в черный цвет. На снимке ниже – отличный пример поперечный срез нервного волокна. Черные кружки – отдельные аксоны с их оболочкой, которая богата миелином – веществом, являющегося своего рода изолятором для нервного волокна, и способствующего распространению нервного импульса, а также очень охотно связывающим высший оксид осмия.Автор фотографии: уточняется

Источник:vetmed.vt.edu

Окраска по Папаниколау (Papanicolaou)

   Эта окраска не гистологическая, а цитологическая и ее название произносится цитологами также часто, как патологоанатомами – гематоксилин/эозин. Этот способ окрашивания используют для исследования не срезов тканей, а отдельных клеток, которые цитологам удается достать из разнообразных физиологических (и не очень) жидкостях, гинекологических мазках, смывах, мазках отпечатках и прочая, прочая, прочая.
Автор фотографии: Adam Parsons
Источник: adamparsonsbiomedical.blogspot.ru

Сафранин-О

   Протоколы включающие в себя этот гистологический краситель, который окрашивает муцин, хрящи и цитоплазматических гранул тучных клеток, в насыщенно красный и оранжевый цвет, связываясь с содержащимися в них кислыми протеогликанами.Автор фотографии: уточняется

Источник: atomscientific.com

Изображение из статьи Histopathologic Changes in Growth-Plate Cartilage Following Ischemic Necrosis of the Capital Femoral Epiphysis An Experimental Investigation in Immature Pigs. Harry K.W. Kim, MD, FRCS(C); Phi-Huynh Su, BSc; Yu-Shan Qiu, MD, опубликованной в J Bone Joint Surg Am, 2001 May;83(5):688-697
Источник:jbjs.org

Окраска по Ван-Гизону

   В окраске по Ван-Гизону используется смесь пикриновой кислоты и кислого фуксина. Эта окраска – самый простой метод дифференцировать коллагеновые волокна от прочих компонентов соединительной и гладкомышечной ткани. Метод разработан американским бактериологом Ира Ван-Гизоном (Ira Thompson Van Gieson). При использовании этого метода коллагеновые волокна окрашиваются в красный цвет. Клетки гладкомышечной и поперечнополосатой ткани, ороговевающий многослойный плоский эпителий и гиалин разных оттенков желтого вплоть до коричневатого, а ядра клеток – черными.Автор фотографии: уточняется

Источник: atomscientific.com

Окраска по Вергофу

   Эта окраска разработана американским хирургом офтальмологом и патологом Фредериком Германом Вергофом (Frederick Herman Verhoeff). Методика предназначена для выявления в тканях нормальных или патологически измененных эластических структур. Молекулы красящего вещества образуют химические связи с эластином – главным компонентом некоторых эластических тканевых структур, которых много в тканях, одним из важнейших физиологических качеств которых, является растяжимость к таким относятся, например кожа, артерии и вены, легочная ткань, эластические хрящи. Эластин обладает высокой афинностью по отношению к хлориду железа III с гематоксилином, задерживающий большее количество красящего вещества, таким образом, выделяя эластиновые волокна в срезе ткани. Избыток краски удаляется, оставляя окружающие ткани практически прозрачными, для того чтобы они стали видимыми, используют «контр окраску», чаще всего по методу Ван-Гизона, уже описанному выше. Но на снимке ниже использован обычный гематоксилин и эозин. Таким образом по методу Вергофа эластиновые волокна и ядра клеток окрашиваются в черный цвет, а фон – в цвета использованной контрокраски.Автор фотографии: уточняется

Источник: histologistics.com

Окраска по Фон Косса (von Kossa)

   Эта окраска используется для исследования степени минерализации ткани, то есть выявления выпавших в ткани нерастворимых фосфатов. Принцип окраски заключается в преципитации ионов серебра в кислой среде. Фотохимический распад образующихся фосфатов серебра до металлического серебра, происходящий под воздействием света (процесс, по своей сути, аналогичен таковому происходящему при печати фотографий) позволяет выявить наличие в ткани фосфатов, (чаще всего именно фосфатов кальция), но окраска выявляет лишь присутствие фосфатов, а не кальция самого по себе. Для выявления солей кальция требуются другие окраски, например, уже описанный, ализарин красный. Цветовая схема при этой окраске следующая: фосфаты кальция в массивных депозитах – черного цвета, в мелкодисперсных отложениях – серого. Клеточные ядра – красные, а цитоплазма клеток – светло-розового цвета.Автор фотографии: уточняется

Источник:iupui.edu

   Окраска берлинской лазурью

   Она же железная лазурь, прусский синий, парижская лазурь, прусская лазурь, гамбургская синь, нейблау, в гистологии же известна как реакция Перлса. Этот метод очень распространен в гистологии для выявления в тканях соединений железа (например, при диагностике гемохроматозов и выявления гемосидероза – состояний при которых в тканях, по тем или иным причинам, накапливается избыток соединений железа, что, в конечном счете, приводит к недостаточности внутренних органов). Но, что интересно, здесь используется не готовый пигмент для окраски, а образование пигмента в этом случае, происходит непосредственно в срезе ткани и его образование, связанное с присутствием соединений железа, расценивается как положительная реакция.   Оригинальная методика окраски, описанная в 1867 году как «берлинская лазурь Перлса» названа в честь ее автора  – германского патолога Макса Перлса (Max Perls) (1843–1881), использовавшего растворы гексацианоферрата (II) калия и соляной кислоты. Депозиты соединений железа в тканях под действием этих растворов образуют собственно берлинскую лазурь, гранулы которой, цвета разных оттенков синего, видны в препарате под микроскопом.   Макрофаги нагруженные железосодержащим пигментом гемосидерином в печени мыши. Селезенка является своего рода “кладбищем для эритроцитов” здесь эритроциты отслужившие свой век (это около 120 дней) задерживаются и разрушаются, а из пигмента гемоглобина извлекается “железо” и используется для синтеза новых молекул кислородсвязывающего белка – гемоглобина.Автор фотографии: уточняется

Источник: iupui.edu

   Срез ткани печени с гепатоцитами нагруженным соединениями железа. Такое может происходить при гемосидерозах и гемохроматозах , в результате обусловленного заболеванием массивного распада красных кровяных клеток – гемолиза и последующего скопления железосодержащих продуктов их распада в тканях. Если таких продуктов в тканях накапливается чрезмерное количество, то в таких органах начинает разрастаться содинительная ткань, развивается фиброз функционально активной ткани этих органов, с развитием их недостаточности.Автор фотографии: уточняется

Источник: biologydisease.com

   Срез ткани легкого со скоплениями макрофагов нагруженных гемосидерином. Такие скопления появляются при хронической “застойной” левожелудочковой сердечной недостаточности, когда в системе легочной артерии поднимается давление, из-за того что сердце не может “перекачать” кровь из малого в большой круг кровобращения. Когда давление в ветвях легочной артерии повышено, в полоси альвеол так или иначе начинают проникать эритроциты, они фагоцитируются альвеолярными макрофагами в цитоплазме которых, со временем, накапливается бурый железосодержащий пигмент – гемосидерин, когда таких клеток становится достаточно много (при прогрессирующей сердечной недосточности) они начинают выделятся с мокротой, которая приобретает ржавый оттенок, в такой мокроте при микроскопии можно выявить эти альвеолярные макрофаги, наполненные гемосидерином, их иногда называют клетками сердечных пороков, так как такая степень сердечной недостаточности особенно часто наблюдается при пороках сердца, хотя они также встречаются и при легочных кровотечениях и инфарктах легкого.
Автор фотографии: Yale Rosen
Источник: flickr.com/photos/pulmonary_pathology

Пикросириус красный

   Применяется для селективного выявления коллагена I и III типа. Окрашенные по этому методу препараты могут быть исследованы как при помощи стандартной светлопольной световой микроскопии, тогда коллагеновые волокна будут окрашены в ярко-красный цвет, на бледно-желтом фоне, а клеточные ядра, в идеале, – черного цвета, но также могут быть серые или коричневые.
Изображение из статьи “Salt Induces Myocardial and Renal Fibrosis in Normotensive and Hypertensive Rats”. Henry C. M. Yu, MBChB, MRCP, FRACP, FHKCP; Louise M. Burrell, MBChB, MD, FRACP; M. Jane Black, BSc, PhD; Leonard L. Wu, PhD; Rodney J. Dilley, BSc, PhD; Mark E. Cooper, MBBS, PhD, FRACP;  Colin I. Johnston, MBBS, FRACP
Источник: From the Department of Medicine, University of Melbourne, Austin and Repatriation Medical Center, Heidelberg, and the Morphology Laboratory, Baker Medical Research Institute, Prahran (R.J.D.), Victoria, Australia.   При исследовании препаратов в поляризованном свете, демонстрирующем двоякое лучепреломление коллагеновых волокон, более толстые коллагеновые волокна приобретают ярко желтый или оранжевый цвет , а более тонкие и ретикулиновые волокна – зеленый.
Изображение из статьи “Salt Induces Myocardial and Renal Fibrosis in Normotensive and Hypertensive Rats”. Henry C. M. Yu, MBChB, MRCP, FRACP, FHKCP; Louise M. Burrell, MBChB, MD, FRACP; M. Jane Black, BSc, PhD; Leonard L. Wu, PhD; Rodney J. Dilley, BSc, PhD; Mark E. Cooper, MBBS, PhD, FRACP;  Colin I. Johnston, MBBS, FRACP
Источник: From the Department of Medicine, University of Melbourne, Austin and Repatriation Medical Center, Heidelberg, and the Morphology Laboratory, Baker Medical Research Institute, Prahran (R.J.D.), Victoria, Australia.

Окраска по Шморлю

   Предназначена для окраски костной ткани, для того, чтобы увидеть «лакуны» и «ламеллы» компактной костной ткани, изучение их морфологии имеет большое значение в при диагностике заболеваний костной ткани.На снимке видны окрашенные в красно-бурый цвет «лакуны» в которых находятся остеоциты – зрелые клетки костной ткани, заключенные между окрашенными в зеленоватый цвет «ламеллами» – межклеточным веществом кости, образованном коллагеновыми волокнами, организованными в циркулярно расположенные, в виде цилиндра пластинки, окружающие центральные или гаверсовы каналы, в которых проходят питающие кость сосуды – на снимке видны как крупные, оптически прозрачные отверстия. В тонких канальцах перпендикулярно пронизывающих ламеллы содержатся отростки остеоцитов. Таким образом на этом снимке хорошо видно, что кость это не нечто замершее и мертвое, а совершенно такой же живой орган, как и сердце и печень, только процессы в этом органе протекают намного медленнее, месяцами и годами.
Автор фотографии:{C}{C}{C}   Lutz Slomianka
Источник: embryology.med.unsw.edu.au

Гематоксилин и эозин

   Итак, наконец, поспешествующею милостию золотой стандарт, великий и ужасный, альфа и омега, император и самодержец патологической гистологии – окраска гематоксилином и эозином.

   Гематоксилин – он же натуральный черный №1 добывается из древесины кампешевого дерева (лат. Haematoxylum campechianum).

Автор фотографии: уточняется

Источник: eljardin.info

   Свежесрубленная древесина кампешевого дерева имеет кроваво-красный цвет (откуда и происходит латинское название дерева – «Haematoxylum»), но от окисления пигмента на воздухе древесина принимает сначала тёмно-фиолетовый, а затем тёмно-синеватый и почти чёрный цвет. Из сока коры получаются при содействии солей окиси железа черно-фиолетовые китайские чернила.Автор фотографии: W.P. Armstrong

Источник:waynesword.palomar.edu

   Природа окраски связана с химическим связыванием гемАлюма (комплекса образованного ионами алюминия и гематеина – продукта окисления гематоксилина). Этот комплекс «краска-металл» окрашивает клеточные ядра (а точнее ДНК и РНК, содержащиеся в ядрах) и некоторые другие образования, такие как кератогиалиновые гранулы и кальцифицированный материал в насыщенно синий цвет.
Изображение из статьи: “Quantitative Morphometric Analysis of Liver Biopsy: Problems and Perspectives” Ivan B. Tokin, Ivan I Tokin and Galina F.
Источник: http://www.intechopen.com/books/liver-biopsy/quantitative-morphometric-analysis-of-liver-biopsy-problems-and-perspectives   После того как окрашены ядра, необходима контр окраска, для которой применяют раствор эозина. Эозин – синтетический краситель интенсивно-розового цвета окрашивающий прочие клеточные детали и межклеточное вещество в различные оттенки красного розового и оранжевогоАвтор фотографии: уточняется

Источник: http://thehealthscience.com/showthread.php?847863-Mohs-Surgery

Продолжение следует…

Гистологические окраски часть1.

Источник: https://andreas-zarus.livejournal.com/104536.html

Технологические основы окрашивания кости

Обработка и окрашивание костной ткани

В таком виде декоративного искусства как художественная обработка наиболее дешёвым и доступным материалом на сегодняшний день является цевка.

Она обладает прекрасными декоративными свойствами и легко обрабатывается, в том числе легко поддается окраске. Окрашивание кости – изменение ее естественного цвета.

И что бы мастер смог воплотить задумку и добиться нужного цвета, необходимо знать виды и технологию окрашивания, известные благодаря опыту косторезов.

Художественная обработка кости – это один из старейших видов народного декоративного искусства.

Мастерами исстари использовались для резных работ бивни мамонта и слона, моржовая кость, зуб кашалота и т.п.

Каждый из этих благородных видов кости красив по своему: имеет легкий текстурный рисунок, красивый цвет с широким спектром оттенков, что придает изделиям необыкновенную теплоту и декоративность.

Очевидно, что современным резчикам приходится испытывать затруднения с поиском благородного материала для изготовления продукции, связанных с трудностью добычи ископаемой кости – бивней мамонтов, сложностью заготовки моржовых клыков и зубов кашалота, а соответственно и высокой стоимостью закупаемого сырья.

Поэтому альтернативным дешевым и доступным материалом является так называемая цевка – трубчатая кость крупного рогатого скота, которая обладает прекрасными декоративными свойствами и легко обрабатывается, в том числе поддается окраске, благодаря которой материал преображается в соответствии с задумкой мастера.

Под окрашиванием кости принято понимать процесс изменения естественного цвета кости. Владение технологическими основами окрашивания цевки способствует изготовлению эксклюзивных изделий на основе выразительности и своеобразия разнопланового декора.

С целью качественной окраски материала, изначально производится обезжиривание поверхности цевки посредством отваривания в растворе кальцинированной соды (7-15 г. соды на 1 литр воды) в течение 2-3 часов и последующим промыванием и высушиванием на решетке без резкой смены температур.

В дальнейшем, при необходимости, можно осуществить отбеливание материала для устранения различных изъянов естественной окраски цевки: желтизны, пятен и подобных дефектов. Наиболее эффективным способом отбеливания является погружение заготовки в 30%-ный раствор перекиси водорода на сутки.

Для отбеливания также можно использовать каустическую соду, негашеную известь и др. [1, с.137-139]

В художественной обработке кости выделяют три вида покрытия (тонирование, поверхностное и глубинное окрашивание), каждое из которых имеет свои технологические особенности и может применяться по замыслу мастера.

Наряду с бесценным многовековым опытом косторезов по окрашиванию кости, в НИИ художественной промышленности были разработаны рецепты окрашивания животной кости с целью обогащения декоративных свойств и увеличения сферы применения.

Таблица 1. Способы окраски кости.

Способы окраски кости

Краситель

Время окраски

Особенности окрашивания

тонирование

(подчеркивает глубину резьбы)

графитовый порошок

3-5 минут

порошок втирается в гравировку изделия

акварельные краски

изделие опускается в насыщенный раствор или краска наносится кисточкой, после полируется

поверхностное окрашивание

анилиновый краситель

3-7 часов

изделие опускают в крепкий настой красителя

природный краситель (луковая шелуха, раствор чая)

30-60 минут

природный краситель (1 часть) заливают кипятком (3 части) и настаивают в закрытой посуде. Для интенсивного цвета кость кипятят 30-40 минут

глубинное окрашивание

различные виды химических красителей: медный купорос, хромпик, аммиак и т.д.

7-12 суток

если подогреть процесс ускорится

изделие обматывают проволокой и полностью погружают в раствор химических красителей

Анализ работ мастеров Холмогорского промысла резьбы по кости позволил выявить различные варианты применения окраски цевки при создании художественного образа изделий: сочетание цветных пластин и естественной окраски, цветная гравировка растительных изображений (цветы, веточки с бутонами, ягодные кустики), подкрашенный «глазковый» орнамент в виде концентрических кругов с точкой-глазком посередине и т.д. Подобные элементы создают определённый контраст с отбеленной или естественной молочно-кремовой цевкой и связывают их в единую композицию, дающую ощущение гармоничной согласованности образа изделия.

Рисунок 1- Ларец-теремок. Кость, дерево. Резьба, гравировка. XVIII век. Холмогоры

Рисунок 2. Ларчик-подголовник. Дерево, кость, бумага. Рельефная резьба, цветная гравировка, окраска. Архангельская губерния. XVIII век.Рисунок 3. Шкатулка. Кость, дерево. Резьба, гравировка, окраска. Архангельской губерния. XVIII век.

Посредством процентного смешения красителей и пигментов различных цветов, путем изменения концентрации растворов экспериментально можно получить разнообразные оттенки.

[2] В связи с этим окрашивание цевки способствует расширению художественных возможностей обработки кости, предоставляет мастерам широкое поприще для реализации творческих задумок.

Однако при использовании красящих веществ в работе следует помнить, что кость является натуральным природным материалом, который ценен своим отличием от всех других, поэтому окрашивание будет оправдано лишь в случаях, когда красителями подчеркивается своеобразность и натуральная текстура материала, а также художественная согласованность всех элементов изделия.

Источник: https://novainfo.ru/article/9761

Лечение Костей
Добавить комментарий